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技術(shù)文章
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  • 一文帶你了解qPCR原理與流程,建議收藏再看!實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是一種由PCR技術(shù)發(fā)展而來的分子生物學(xué)技術(shù),它可以通過在DNA擴(kuò)增過程中使用熒光染料來偵測(cè)每個(gè)PCR循環(huán)后產(chǎn)物的總量,具有PCR技術(shù)快速、靈敏的特點(diǎn),同時(shí)還具有更高的特異性、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和可重復(fù)精確定量等優(yōu)勢(shì)。01什么是qPCR?1qPCR化學(xué)原理-探針法qPCR實(shí)驗(yàn)流程包括RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄和qPCR。探針法qPCR原理圖,源自網(wǎng)絡(luò),侵刪qPCR探針法是一種使用熒光探針來測(cè)量PCR...

    2024 11-12

  • 一種重組人粒細(xì)胞刺激因子的生產(chǎn)方法重組人粒細(xì)胞刺激因子(rG-CSF)的生產(chǎn)方法主要包括基因克隆、表達(dá)、純化和活性驗(yàn)證等步驟。以下是一個(gè)典型的生產(chǎn)流程:一、基因克隆選擇合適的載體使用能夠在宿主細(xì)胞中進(jìn)行高效表達(dá)的質(zhì)粒載體,例如pET系列或pGEX系列?;颢@取從人類基因組中獲取G-CSF基因序列,或通過合成方法獲得。PCR擴(kuò)增使用特異性引物對(duì)G-CSF基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,添加限制酶位點(diǎn)以便后續(xù)克隆??寺∪胼d體將擴(kuò)增的G-CSF基因片段通過限制酶切割后,連接到選擇的載體中,形成重組質(zhì)粒。二、轉(zhuǎn)化與表達(dá)轉(zhuǎn)化宿主細(xì)...

    2024 11-4

  • 細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑的檢查和觀察方法細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑的檢查和觀察方法主要包括以下幾個(gè)方面:1.外觀觀察顏色:檢查試劑的顏色是否與標(biāo)準(zhǔn)一致,任何異常的顏色變化可能表示降解或污染。透明度:是否清澈無懸浮物,渾濁可能指示有雜質(zhì)或微生物污染。2.pH值測(cè)定使用pH試紙或pH計(jì)測(cè)定試劑的酸堿度,確保其在適宜的范圍內(nèi)(通常在7.0-7.4之間)。3.無菌檢查培養(yǎng)基接種法:將試劑接種到無菌培養(yǎng)基(如LB培養(yǎng)基)中,觀察是否有細(xì)菌或真菌生長(zhǎng)。過濾:使用0.22微米濾膜過濾試劑,以去除可能存在的微生物,然后進(jìn)行無菌培養(yǎng)檢查。4....

    2024 10-9

  • T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基的開發(fā)與應(yīng)用,助力免疫疾病治療新突破在醫(yī)學(xué)科技日新月異的今天,T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基的開發(fā)與應(yīng)用正逐步成為免疫疾病治療領(lǐng)域的一顆璀璨新星,為無數(shù)患者帶來了新的希望。T淋巴細(xì)胞作為適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中的關(guān)鍵成員,其在抗腫瘤、抗感染及自身免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮著不可替代的作用。而T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基,作為這一細(xì)胞體外擴(kuò)增與功能研究的基石,其重要性不言而喻。T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基的開發(fā),旨在通過模擬體內(nèi)微環(huán)境,為T細(xì)胞提供一個(gè)理想的生長(zhǎng)與分化平臺(tái)。這一過程中,研究人員不斷探索并優(yōu)化培養(yǎng)基的配方,以確保其包含所有必要的營養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子和激素...

    2024 9-19

  • 細(xì)胞凍存液的功能及配比介紹細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞的長(zhǎng)期保存和凍存。其主要功能包括:保護(hù)細(xì)胞:細(xì)胞在低溫冷凍過程中容易形成冰晶,這可能導(dǎo)致細(xì)胞膜破裂或細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)損壞。凍存液中的冷凍保護(hù)劑(如DMSO或甘油)能夠減少冰晶的形成,從而保護(hù)細(xì)胞。維持細(xì)胞活性:冷凍保護(hù)劑還能保護(hù)細(xì)胞在冷凍和解凍過程中的生物化學(xué)反應(yīng),維持細(xì)胞的活性和功能。長(zhǎng)期保存:凍存液使細(xì)胞能夠在極低溫度下(通常在液氮中約-196°C)長(zhǎng)期保存,而不會(huì)喪失其生物學(xué)特性和實(shí)驗(yàn)價(jià)值。便于運(yùn)輸:凍存液中的細(xì)胞可以在不同實(shí)驗(yàn)室或研究機(jī)構(gòu)之間運(yùn)輸,方便科...

    2024 9-2

  • 高效準(zhǔn)確:淋巴細(xì)胞分離液在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用在生物醫(yī)學(xué)研究的浩瀚領(lǐng)域中,淋巴細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,其研究對(duì)于揭示疾病機(jī)制、開發(fā)新型療法具有不可估量的價(jià)值。而淋巴細(xì)胞分離液,這一看似簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)工具,卻以其高效準(zhǔn)確的特性,在淋巴細(xì)胞的研究中扮演著至關(guān)重要的角色。淋巴細(xì)胞分離液,基于其密度梯度原理,能夠在不破壞細(xì)胞活性的前提下,將血液中的淋巴細(xì)胞與其他成分有效分離。這一過程不僅簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟,提高了研究效率,更重要的是,它確保了分離出的淋巴細(xì)胞具有較高的純度和活性,為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究提供了可靠的基礎(chǔ)。在生物醫(yī)學(xué)研究中...

    2024 8-27

  • 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程:淋巴細(xì)胞分離液助力免疫細(xì)胞分析新突破在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中,免疫細(xì)胞分析占據(jù)著舉足輕重的地位。它不僅揭示了機(jī)體免疫系統(tǒng)的復(fù)雜機(jī)制,還為疾病診斷、治療及疫苗開發(fā)提供了關(guān)鍵依據(jù)。然而,傳統(tǒng)的免疫細(xì)胞分析方法往往面臨細(xì)胞分離效率低下、純度不足等挑戰(zhàn),限制了研究的深入進(jìn)行。幸運(yùn)的是,隨著淋巴細(xì)胞分離液技術(shù)的不斷發(fā)展和完善,這一難題正逐步得到解決,為免疫細(xì)胞分析帶來了新的突破。淋巴細(xì)胞分離液,作為一種專門設(shè)計(jì)用于從全血中高效分離淋巴細(xì)胞的試劑,其密度梯度原理使得不同密度的細(xì)胞成分能夠自然分層,從而實(shí)現(xiàn)淋巴細(xì)胞的精準(zhǔn)提...

    2024 8-22

  • 流式細(xì)胞術(shù)之檢測(cè)工作原理在流式細(xì)胞術(shù)中使用的儀器稱為流式細(xì)胞分析儀,通??s寫為“細(xì)胞分析儀"。流式細(xì)胞分析儀由一個(gè)用于進(jìn)行細(xì)胞處理的流體系統(tǒng)和一個(gè)包括數(shù)據(jù)采集信號(hào)檢測(cè)器和處理器的光學(xué)系統(tǒng)組成。專為FACS設(shè)計(jì)的儀器還包含一個(gè)細(xì)胞分選組件,該組件可將細(xì)胞引導(dǎo)到不同的捕獲容器中。流體系統(tǒng)設(shè)計(jì)用于生成單細(xì)胞的均勻流,以確保當(dāng)細(xì)胞被用于檢測(cè)的光源照射時(shí),能夠進(jìn)行適當(dāng)分析。這通過使用加壓管將細(xì)胞從樣品管注入流室中來完成。從容器(通常是一根試管或一塊多孔板)中抽取細(xì)胞樣品,并將其注入流動(dòng)液體(稱為鞘液)層流中間...

    2024 8-21

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