產(chǎn)品名稱:Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit 產(chǎn)品貨號(hào):Y30021 產(chǎn)品說(shuō)明: 使用CRISPR / Cas9和人類誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞(hiPS)進(jìn)行精確,無(wú)足跡的基因編輯的*組合,可在產(chǎn)生疾病模型時(shí)提高復(fù)雜性,從而促進(jìn)新療法的快速發(fā)展。 我們的CRISPR / Cas9系統(tǒng)是介導(dǎo)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中基因組編輯的一種簡(jiǎn)單的,RNA可編程的方法;它可用于在hiPS細(xì)胞中產(chǎn)生基因敲除(通過(guò)插入/刪除)或敲除(通過(guò)HDR)。交付Cas9-sgRNA核糖核蛋白(RNP)復(fù)合物后,必須分離單個(gè)細(xì)胞并將其擴(kuò)增為克隆細(xì)胞系,以分離和篩選目標(biāo)基因型。傳統(tǒng)上,從作為集落生長(zhǎng)和傳代的經(jīng)過(guò)編輯的hiPS細(xì)胞建立克隆種群效率低下且耗時(shí)。通常,它會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡或過(guò)早分化。為克服這一挑戰(zhàn),我們開(kāi)發(fā)了完整的系統(tǒng),該系統(tǒng)通過(guò)有效傳遞Cas9-sgRNA RNP復(fù)合物和hiPS細(xì)胞的單細(xì)胞克隆,將無(wú)足跡的基因編輯結(jié)合在一起。使用我們基于單層的培養(yǎng)系統(tǒng)可成功完成單細(xì)胞克隆 產(chǎn)品介紹: 人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(Human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)是一個(gè)功能強(qiáng)大的研究工具和疾病模型,因?yàn)槠渚邆湓鲋场⒆晕腋?、分化為多種細(xì)胞類型的能力。此外,人iPS細(xì)胞還可以再現(xiàn)細(xì)胞來(lái)源個(gè)體的疾病表型和基因型。將人iPS細(xì)胞結(jié)合基于CRISPR/Cas9的基因編輯技術(shù),可以在同基因的細(xì)胞系中研究特定基因改變引起的功能影響,因?yàn)榛蚓庉嬤^(guò)的人iPS細(xì)胞能提供可再生的、無(wú)遺傳變異的患病細(xì)胞和健康細(xì)胞資源。 CRISPR/Cas9系統(tǒng)已經(jīng)成為一個(gè)強(qiáng)大的基因編輯工具,因?yàn)槠涓叩陌邢蛱禺愋?,編輯效率和易用性。該技術(shù)的強(qiáng)大主要源于它的簡(jiǎn)單,因?yàn)槿恐恍枰粋€(gè)Cas9核酸酶結(jié)合一個(gè)單鏈向?qū)NA(single guide RNA,sgRNA) 就可以決定靶向特異性(Jinek et al. 2012)。這種RNA編程的(RNA-programmable)方法利用了非同源末端連接(non-homologous end joining,NHEJ) DNA修復(fù)途徑的易錯(cuò)特性,進(jìn)而產(chǎn)生基因敲除(通過(guò)插入/刪除)。這種方法也可以通過(guò)同源重組(homology-directed repair,HDR)途徑被用于基因敲入。 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的組件可以通過(guò)多種方法成功導(dǎo)入至靶細(xì)胞,包括基于載體的表達(dá)系統(tǒng),RNA轉(zhuǎn)染, 導(dǎo)入Cas9/sgRNA核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)復(fù)合物(Sander and Joung 2014)等。與基于載體的方法相比,直接導(dǎo)入Cas9/sgRNA RNPs提供了一種快速轉(zhuǎn)入基因編輯實(shí)驗(yàn)的方法,同時(shí)脫靶效應(yīng)的可能性更小(Kim et al. 2014)。 一旦Cas9/sgRNA RNP復(fù)合物被導(dǎo)入,為了分離和篩選感興趣的基因型,單細(xì)胞必須被分離并擴(kuò)增為克隆細(xì)胞系。傳統(tǒng)上,從基因編輯的hiPS細(xì)胞建立一個(gè)克隆群是低效的、具有挑戰(zhàn)性的和耗時(shí)的,因?yàn)閔iPS 細(xì)胞是以集落生長(zhǎng)和傳代的。通常,這會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡和提前分化。然而,Cellartis基因編輯和單細(xì)胞克隆系統(tǒng)包含一個(gè)成分確定的培養(yǎng)系統(tǒng)(由基礎(chǔ)培養(yǎng)基,包被劑,和添加劑組成),用于有效形成單細(xì)胞克隆和擴(kuò)增基因編輯后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一個(gè)基于單層培養(yǎng)的系統(tǒng),規(guī)避了集落狀培養(yǎng)帶來(lái)的挑戰(zhàn),允許單細(xì)胞傳代和促進(jìn)接種的單細(xì)胞存活和后續(xù)擴(kuò)增。 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一個(gè)完整的,在無(wú)飼養(yǎng)層和成分確定條件下,用于hiPSCs有效擴(kuò)增和擴(kuò)大生產(chǎn)的系統(tǒng)。試劑盒包含了從接種單細(xì)胞至96孔板到擴(kuò)增至48孔板過(guò)程中所有必要的試劑。單細(xì)胞克隆擴(kuò)增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xù)培養(yǎng)。 Cellartis iPSC rCas9 Electroporation and Single-Cell Cloning System (Code No. 632643) 是一個(gè)完整的系統(tǒng),允許通過(guò)電穿孔的方法對(duì)hiPSCs進(jìn)行有效的基因編輯以及隨后的單細(xì)胞克隆形成和擴(kuò)增至48孔板。該系統(tǒng)中提供了重組Cas9蛋白質(zhì),以及產(chǎn)生大量sgRNAs所有必要的試劑,用于電穿孔hiPSCs。系統(tǒng)中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (前面所述) 組份,用于進(jìn)行基因編輯后的單細(xì)胞克隆形成和擴(kuò)增。單細(xì)胞克隆擴(kuò)增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xù)培養(yǎng)。 Cellartis iPSC CRISPR/Cas9 Gesicle and Single-Cell Cloning System (Code No. 632642)是一個(gè)完整的系統(tǒng),允許通過(guò)gesicle導(dǎo)入Cas9/sgRNA復(fù)合物進(jìn)行有效的基因編輯隨后的單細(xì)胞克隆形成和擴(kuò)增至48孔板。Gesicles是一種無(wú)毒的、高效的、替代電穿孔的方法,不依賴昂貴的設(shè)備或耗材。系統(tǒng)中提供所有的必要試劑用于產(chǎn)生細(xì)胞衍生的納米囊泡(稱做gesicles),來(lái)轉(zhuǎn)導(dǎo)Cas9和sgRNA至hiPSCs。系統(tǒng)中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit(前面所述)組份,用于進(jìn)行基因編輯后的單細(xì)胞克隆形成和擴(kuò)增。單細(xì)胞克隆擴(kuò)增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xù)培養(yǎng)。 ■ 產(chǎn)品特點(diǎn) ·在hiPSC中進(jìn)行高效的基因編輯—使用電穿孔或囊泡來(lái)遞送Cas9蛋白和sgRNA,而沒(méi)有基因組整合并且降低脫靶效應(yīng) ·優(yōu)異的單細(xì)胞存活率—編輯的hiPSC植入96孔板中的單個(gè)細(xì)胞 ·編輯后和單細(xì)胞克隆期間保持多能性-hiPSC維持多能性標(biāo)記Oct-4,TRA-1-60和SSEA-4的高水平(> 90%) ·穩(wěn)定的核型從頭到尾—在編輯,單細(xì)胞克隆和擴(kuò)增過(guò)程中保持正常且穩(wěn)定的核型 ·靈活地按自己的方式進(jìn)行基因編輯實(shí)驗(yàn)-選擇完整的試劑盒,該試劑盒可以使用基于電穿孔的(Code No. 632643)或基于囊泡的(Code No. 632642)CRISPR / Cas9技術(shù)提供編輯和單細(xì)胞克隆解決方案,或者在您自己的編輯實(shí)驗(yàn)后,利用培養(yǎng)基試劑盒(代碼Y30021)執(zhí)行有效的單細(xì)胞克隆 ·在整個(gè)基因編輯/單細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)中繼續(xù)使用DEF-CS技術(shù)-使用Cellartis DEF-CS 500培養(yǎng)系統(tǒng)(代碼編號(hào)Y30010)在基因編輯實(shí)驗(yàn)之前和之中,然后在單細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)之后放大期間 產(chǎn)品名稱:CellArits授權(quán) iPSC單細(xì)胞克隆培養(yǎng)基試劑盒 產(chǎn)品貨號(hào):Y30021 現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢 歡迎您的致電 400 021 2200 150 2101 0459 CellArtis代理商:重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 熱賣產(chǎn)品: 品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品描述 包裝 CellArtis Y30010 DEF-CS 500 Culture System,DEF-CS 500培養(yǎng)系統(tǒng),人iPS和人ES增殖用培養(yǎng)基 1套 CellArtis Y30021 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit 1套 CellArtis Y40030 GS2-M小鼠 iPS/ES干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 1套 產(chǎn)品名稱:Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit 產(chǎn)品貨號(hào):Y30021 現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢 歡迎您的致電 400 021 2200 150 2101 0459 CellArtis代理商:重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 Cellartis品牌擁有超過(guò)15年的豐富經(jīng)驗(yàn),可為涉及干細(xì)胞的研究應(yīng)用提供產(chǎn)品和服務(wù)。該品牌源自同名公司(現(xiàn)為Takara Bio Europe AB),該公司由哥德堡大學(xué)的研究人員于2001年成立。從歷*看,Cellartis品牌的主要關(guān)注點(diǎn)是開(kāi)發(fā)和分配干細(xì)胞系,包括用于人類或普通用途的人類胚胎干細(xì)胞(hESCs)和人類誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞(hiPSC)。近,該品牌的范圍已擴(kuò)大到還包括諸如培養(yǎng)系統(tǒng),培養(yǎng)基和試劑之類的產(chǎn)品,這些產(chǎn)品使我們的專業(yè)知識(shí)和創(chuàng)新技術(shù)更容易為生命科學(xué)研究人員所使用。該品牌的重要里程碑涉及Cellartis DEF-CS培養(yǎng)系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)和商業(yè)化,這是一種培養(yǎng)干細(xì)胞的革命性方法,相對(duì)于其他方法,它具有明顯的優(yōu)勢(shì)。 產(chǎn)品名稱:CellArits授權(quán) iPSC單細(xì)胞克隆培養(yǎng)基試劑盒 產(chǎn)品貨號(hào):Y30021 現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢 歡迎您的致電 400 021 2200 150 2101 0459 CellArtis代理商:重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司是中國(guó)中西部地區(qū)*家專業(yè)從事生物技術(shù)產(chǎn)品銷售(包括:生物試劑、生物耗材、儀器設(shè)備、技術(shù)產(chǎn)品等)、干細(xì)胞儲(chǔ)存、干細(xì)胞相關(guān)基礎(chǔ)研究、干細(xì)胞臨床應(yīng)用研究及技術(shù)服務(wù)的高新技術(shù)企業(yè)。供應(yīng)造血干細(xì)胞培養(yǎng)基,神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基,干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,胚胎/IPS干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,心肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基,外周血核型分析培養(yǎng)基。公司立足西南,面向全國(guó),以“積極借鑒成功經(jīng)驗(yàn),追求創(chuàng)新”為核心思想,將為客戶提供水平的干細(xì)胞產(chǎn)品和服務(wù)。 “華雅干細(xì)胞”是由我們公司的全體員工用心打造的一塊金質(zhì)招牌,我們的團(tuán)隊(duì):富有激情、相互信任、目標(biāo)*、熱愛(ài)干細(xì)胞事業(yè)、用心為我們的干細(xì)胞客戶服務(wù)。干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展需要產(chǎn)業(yè)鏈中的每個(gè)成員精耕細(xì)作,協(xié)同發(fā)展,實(shí)踐創(chuàng)新。 華雅干細(xì)胞公司立志為中國(guó)干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步與發(fā)展做出應(yīng)有的貢獻(xiàn),為人類健康事業(yè)更上一層樓而不懈努力! 咨詢CellArtis更多產(chǎn)品 歡迎您的致電 400 021 2200 150 2101 0459 CellArtis代理商:重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 |